Brukar ställa frågor på de som finns i föreläsningar, titta på gamla frågor, inte ställa omöjliga frågor.
Bakgrund: Vi ska bli läkare, behöver veta vad som händer i humana celler
Generella bubblan gäller i våra celler
CMG helikas:
- Claes Mikael Gustavsson heter föreläsaren!
- MCM för att sätta ihop
- Gins
- Cdc45
Heter delta och epsilon heter polymerasen de är lite olika sliding camps heter PCNA
leading strand:
- DNA pol epsilon
- sliding clamp PCNA lagging strand:
- DNA pol delta
- sliding clamp PCNA
Löser problemet att RNA primer inte ska sitta löst
Primaset skiljer sig lite gran DNA-polymeras
- RNA-primarna är c:a 5 olika
- finns en risk att trilla av, de vill man inte i våra celler
- vi vill vara säkra på att den verkligen används
- alfa.primas
- DNA-polymeras alfa-primas
- både primas och polymeras i samma
- enzym som sitter ihop (namn?)
om man har en mallsträng kommer enzymet att verka först
de kan byta plats utan att släppa
behöver bara en liten extra snutt, kommer sitta mkt mer stabilt på DNA, utan att det finns risk att primern trillar bort.
Vad är de olika polymerasen?
- alpha-primas
- delta
- epsilon
Ser likadana ut i bakterier, det är en ring som sitter och håller fast DNA pol Man kan uttrycka antikroppar mot PCNA, kan kroppen utveckla av misstag.
SLE/Lupus PCNA ANA
Kan inte dela innan DNA-syntesen är färdig och heller inte sätta igång, specifikt. En gång per cellcykel. Då får vi felaktigt antal kopier.
Vi har upp till 30 000 origins i våra cell Alla går inte igång alltid Många måste gå igång för att kunna replikera tillräckligt fort 50-300kbp Ska börja ungefär samtidigt. Alla behövs
Hur hittar man en origin?
Det finns ett komplex som binder hela tiden, Origin recognition complex - komplexet som hittar origin. Som består av 6 proteiner. Sitter fast hel cellcykeln. En slags markör.
Hur påbörjas DNA replikation?
två rekryteringsfaktorer hjälper ORC att locka till sig DNA helikaset MCM.
laddningsfaktorer:
- Cdc6 och cdt1 till ORC
- ORC complex sitter i hel cellcykeln
- CDC6 och CDT1
- Helikaset
- Sen laddar CDC6/CDT1/ORC upp MCM i G1-fasen
Nu är det laddat, men inte aktivt.
Kräver höga nivår av cyklinberoende kinas (CDK) för att kunna bilda CMG-helikaset
Viktigt att det bara går att aktiva helikaset när det finns mycket CDK
- som en pistol som är laddad, för att kunna få iväg kulan
- CMG helikas smälts och replikationen kan man börja
- Se till att man inte får en dubbel aktivering (HUR?)
Noggrant: skilj laddning från aktivering
Problem vid DNA-replikation Hur kan ändarna på linjärt DNA replikeras? Vi måste ju ha en RNA-primer? Detta är ett klassiskt problem.
- Behöver ha en RNA-primer i början, men när vi kommer ut i slutet
- den sista vi behöver lagging strand för behöver vi en primer
- de fixar inte primerasen
- vi kommer förlora lite i 5’-änden, över tiden blir det kortare och kortare till slut försvinner det
- hur säkerställs det att det gör att replikera hela vägen ut i ändan?
I ändarna på kromsomerna kallas telomerer
- De blir kortare och kortare till cellen dör
- Vilket betyder att en cell kan bara delas ett visst antal gånger, sen dör cellerna
- Men det gäller inte alla celler
- gäller somatiska celler
- gäller inte stamceller
- gäller inte cancerceller
- vad är det som gör att telomererna kan finnas kvar i stam och cancerceller, men det blir kortare och kortare i alla andra celler?
I centrala dogman DNA→RNA→protein Men det finns möjlighet att gå RNA→DNA vilket är omvänt transkriptas
Telomeras förlänger kromsomändarna.
- Sker genom att lägga till en kort,
- behöver en mall för att starta
- har med sig en egen bit RNA som fungerar som mall
- alla ändar ser likadana ut i slutändan (C A A U C C C A A U C)
- lägger till skräp DNA så det är okej att förlora lite i ändarna